Порада #26: Калібрування внутрішнього стандарту Cross Channel та його кількісне визначення
![](https://img.ua/wp-content/themes/IMG/img/IMG/news/Vector.png)
![](https://img.ua/wp-content/uploads/2021/02/empower-3_1100-2.jpg)
В пораді минулого тижня для програмного забезпечення Empower (CDS) ми розглянули як виконати калібрування внутрішнього стандарту та кількісне визначення. Ця порада стосується способів міжканального (cross-channel) калібрування та кількісного визначення внутрішнього стандарту.
Поїхали!
Тепер, коли ми розуміємо, як кількісно визначити внутрішній стандарт, давайте вивчимо випадок, коли пік внутрішнього стандарту знаходиться в каналі даних, відмінному від каналу з піками, які ми намагаємося оцінити. Це може бути у випадку використання фотодіодного детектора (PDA) або мас-детектора (MS). Звучить як нудна робота, але це легше, ніж ви думаємо! (Ці дані були зібрані за допомогою мас-детектора ACQUITY QDa, а канали інтересу – QDa1, QDa2 та QDa3.)
Крок 1
Введіть необроблені дані (Injections або Sample Set) у Review та відкрийте метод обробки. Клацніть інструмент Метод обробки (Processing Method) (рис. 1).
![Рисунок 1](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-1-1.png)
Крок 2
Перейдіть на вкладку Components та прокрутіть праворуч, щоб побачити поле Канал (Channel). Клацніть у полі Channel для кожного компонента та виберіть Channel (рис. 2).
![Рисунок 2](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-2-1.png)
Крок 3
Прокрутіть праворуч, щоб побачити поле Internal Std. Клацніть у полі Internal Std для піків, які будуть відкалібровані / кількісно визначені за допомогою внутрішнього стандарту, та виберіть внутрішній стандарт зі списку (рис. 3). Збережіть всі зміни в способі обробки (Processing Method) та вийдіть з огляду.
![Рисунок 3](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-3-1.png)
Крок 4
У вікні проекту правою кнопкою миші клацніть на ін’єкції та виберіть Alter Sample (рис. 4).
![Рисунок 4](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-4-1.png)
Крок 5
Введіть Sample Weights та Dilutions для ваших зразків, а потім натисніть інструмент «Сума» (Amount), щоб ввести суми для стандартів (рис. 5).
![Рисунок 5](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-5-1.png)
Крок 6
У Редакторі компонентів (Component Editor) імена компонентів повинні відповідати іменам, які ви ввели у спосіб обробки (processing method). Клацніть інструмент «Copy from Process Method» (рис. 6).
![Рисунок 6](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-6-1.png)
Крок 7
Виділіть метод обробки (Processing Method) та натисніть кнопку Open, яка копіює назви компонентів з методу обробки в редактор компонентів (рис. 7).
![Рисунок 7](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-7-1.png)
Крок 8
Виберіть STANDARDS & UNKNOWNS зі списку SampleSet Type. Введіть кількість внутрішнього стандарту для всіх стандартів та зразків. Потім введіть у стандарті суми для інших компонентів (рис. 8). Клацніть ОК у Редакторі компонентів (Component Editor), збережіть усі зміни, внесені в Alter Sample, та вийдіть із Alter Sample.
![Рисунок 8](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-8-1.png)
Крок 9
Повернувшись у вікно проекту, клацніть правою кнопкою миші на Injections та оберіть Process. Виберіть Набір методів (Method Set) та натисніть кнопку ОК (рис. 9).
![Рисунок 9](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-9-1.png)
Оскільки ми зібрали кілька каналів за ін’єкцію, ми обробимо набір методів, який визначає канали та методи їх обробки (рис. 10).
![Рисунок 10](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-10-1.png)
Крок 10
Перейдіть на вкладку Result, клацніть правою кнопкою миші результати та виберіть Review (рис. 11).
![Рисунок 11](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-11-1.png)
Крок 11
Виберіть один із результатів вибірки та відзначте, що в полі Amount відображається розраховане значення для складової, що цікавить. Це значення вже виправлено для ваги зразка (Sample Weight) та розведення (Dilution), тому це остаточна сума. Клацніть на вкладці 2D Channels в лівому нижньому куті (рис. 12).
![Рисунок 12](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-12-1.png)
Крок 12
Ми бачимо безліч каналів зібраних даних та пов’язані з ними підканали, що входять до складу даних. Виділіть наступний канал за допомогою позначки у полі Видиме (Visible) (рис. 13).
![Рисунок 13](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-13-1.png)
Крок 13
Клацніть на вкладку Peaks, щоб переглянути кількісні результати (рис. 14).
![Рисунок 14](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-14-1.png)
Крок 14
Повторіть кроки 12 та 13, щоб переглянути результати для наступного каналу (рис. 15).
![Рисунок 15](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-15-1.png)
Крок 15
Клацніть інструмент Калібрувальна крива (Calibration Curve). У списку компонентів (Component list) виберіть компонент інтересу. Вісь “y” калібрувальної кривої – це відношення площі (Area Ratio). Поле відгуку в таблиці відображає відношення площі піків компонента до внутрішньої стандартної площі піків для стандартів калібрування (рис. 16).
![Рисунок 16](/wp-content/uploads/2021/02/tip-26-16-1.png)
Це досить просто!
Заключні моменти:
- Ми збираємо кілька каналів даних на одну ін’єкцію; тому при створенні способу обробки легше працювати з ін’єкціями.
- Працюючи в Review, рекомендую додати ім’я зразка (Sample Name) та канал до легенди, щоб, клацаючи по каналах даних, можна було легко побачити, що це таке.
- Цю процедуру можна дотримуватися як для інтерфейсів QuickStart, так і для Pro.
Наступного тижня в Пораді #27: Використання придатності системи для позначення невдалих результатів.
Більше ресурсів:
- Хочете дізнатися більше? Ознайомтеся з нашими навчальними курсами та електронним навчанням
- Дивіться всі наші поради щодо використання програмного забезпечення Empower CDS
- Коментарі? Приєднайтесь до #EmpowerTips або @WatersCorp у Twitter.
- Надішліть огляд Empower 3 за допомогою Select Science.